安泰高压放大器ATA-2161在高通量微液滴分选中的应用

发布时间:2021-9-27 15:07    发布者:agitek2008
关键词: 高压放大器
实验名称:高压放大器在微液滴高通量液滴分选实验中的应用
实验目的:基于微液滴的单细胞测序通量高,交叉污染程度低,被广泛应用于单细胞分析,由于液滴在生成时液滴内包裹细胞与微珠的情况服从双泊松分布,为保证有效样本纯度,造成了样本损失问题与有效样本比例过低的问题。针对此问题,本论文设计并实验了一种高通量液滴分选与融合的方案,旨在解决由双泊松分布问题造成的样本损失。
实验设备:微流注射泵,激光器没数据采集卡,信号发生器,ATA-2161高压放大器,示波器,高通滤光片。
实验过程:
(1)细胞分选方案设计;
如下图所示为荧光激发液滴分选方案设计原理图,液滴在高速通过荧光检测的光斑位置处时,阳性液滴被激光激发发出荧光,荧光经物镜以及光路射入PMT阴极,经PMT放大后传入信号采集系统,触发信号触发信号发生器,输出一段恒定的交流电压,后再经ATA-2161高压放大器放大为高频高压交流电,加在电极两端用于对液滴施加介电泳力。
液滴分选方案实验原理图
(2)FADS 系统搭建。
主要由三部分组成:微流控芯片、光电检测模块、数据采集与控制系统模块。
系统实物图
将生成好的液滴置入注射器中,倒置使液滴全部悬浮于液面以上,设置体积流速为20μL/h将液滴从水相入口注入,取1mL油作为连续相以700μL/h体积流速从对应入口注入。将芯片置于倒置显微镜载物台上,并调整位置使得激光光斑垂直照射在流道中央,最后固定芯片位置,持续注射液滴,观察Labview前面板上的荧光检测信号与高速摄像机拍摄画面,调节高压放大器放大倍数,使得液滴在不破裂的情况下能够被完整地拉入阳性流道。
实验结果:
在正常状态下,液滴在油加速后高速流过流道,没有包裹荧光微球的液滴没有激活电极,所以在流场曳力作用下流入较宽的默认流道;如图b所示,当包裹着16微米荧光微球的液滴经过光斑检测区域时,微球被激发发出荧光,被高速摄像机与PMT捕捉,而后通过检测系统与控制系统激活电极,电极给与液滴-一个正介电泳力,将液滴拉入较为窄的分选流道,如图c中被拉入分选流道的液滴即为图b中的发光液滴。以此完成液滴高通量分选。
通过分选包裹着488nm荧光微球的液滴,从理论_上实现了基于介电泳的荧光激发液滴分选,且准确率较高。
实验中用到的高压放大器ATA-2161主要指标:
本文实验素材由西安安泰整理发布,安泰高压放大器广泛应用于压电陶瓷驱动、超声波测试、声呐系统应用和MEMS测试等,如果想了解高压放大器更多应用,欢迎访问安泰测试网www.agitek.com.cn。

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